Larry Daley (Ben Stiller) este un bărbat divorţat, tată al unui băiat pe nume Nick (Jake Cherry), care locuieşte în New York. Pentru a nu fi nevoit să se mute din nou din apartamentul său, el acceptă un job ca paznic de noapte la Muzeul de Istorie Naturală după ce ultimii trei predecesori ai săi tocmai au ieşit la pensie.